न्यू टेक की पूरी तरह से स्वचालित न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और पहचान मशीन

पाँच शक्तियाँ :
● न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और शुद्ध चरण के साथ कॉन्फ़िगर किया गया उपकरण
● अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण मॉड्यूल के साथ कॉन्फ़िगर किया गया उपकरण
● उपकरण पूरी तरह से स्वचालित रूप से कॉन्फ़िगर किया गया
● परिवर्तनीय तापमान प्रवर्धन के साथ कॉन्फ़िगर किया गया उपकरण
● उपकरण पूरी तरह से संलग्न अभिकर्मक किट के साथ कॉन्फ़िगर किया गया

1.क्या न्यूक्लिक एसिड डिटेक्शन अभिकर्मकों को निकालने और शुद्ध करने की आवश्यकता है?
न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने का सिद्धांत इस प्रकार है: प्राइमर की कार्रवाई के तहत, डीएनए पोलीमरेज़ का उपयोग टेम्पलेट डीएनए/आरएनए (एनए के रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन की आवश्यकता) पर श्रृंखला प्रतिक्रिया प्रवर्धन करने के लिए किया जाता है, और फिर जारी फ्लोरोसेंट सिग्नल की मात्रा निर्धारित करने के लिए पता लगाया जाता है। क्या नमूने में पता लगाए जाने वाले रोगज़नक़ का न्यूक्लिक एसिड (डीएनए/आरएनए) है।

1) जिन नमूनों को निकाला या शुद्ध नहीं किया गया है उनमें कई घटक शामिल हो सकते हैं जो अंतिम परिणाम को प्रभावित करते हैं: न्यूक्लीज (जो लक्ष्य न्यूक्लिक एसिड को भंग कर सकता है और गलत नकारात्मक का कारण बन सकता है), प्रोटीज (जो डीएनए पोलीमरेज़ को कम कर सकता है और गलत नकारात्मक का कारण बन सकता है), भारी धातु नमक (जो सिंथेज़ को निष्क्रिय करता है और गलत सकारात्मक का कारण बनता है), बहुत अम्लीय या बहुत क्षारीय पीएच (जिसके कारण प्रतिक्रिया विफल हो सकती है), अपूर्ण आरएनए (गलत नकारात्मक रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन का कारण बनता है) असफलता)।

2) कुछ नमूनों को सीधे बढ़ाना मुश्किल होता है: ग्राम-पॉजिटिव और कुछ परजीवी, उनकी मोटी कोशिका दीवारों और अन्य संरचनाओं के कारण, यदि वे न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और शुद्धिकरण प्रक्रिया से नहीं गुजरते हैं, तो निष्कर्षण-मुक्त किट ऐसे में विफल हो सकती है। नमूने.

इसलिए, न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण चरण के साथ कॉन्फ़िगर किए गए परीक्षण किट या उपकरण का चयन करने की अनुशंसा की जाती है।

2. रासायनिक निष्कर्षण या भौतिक अल्ट्रासोनिक विखंडन निष्कर्षण?
सामान्यतया, रासायनिक निष्कर्षण को अधिकांश पूर्व-उपचार और शुद्धिकरण पर लागू किया जा सकता है। हालाँकि, मोटी दीवार वाले ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया और कुछ परजीवियों में, यह भी मामला है कि रासायनिक निष्कर्षण प्रभावी न्यूक्लिक एसिड टेम्पलेट प्राप्त नहीं कर सकता है, जिसके परिणामस्वरूप गलत नकारात्मक पहचान होती है। इसके अलावा, रासायनिक निष्कर्षण अक्सर मजबूत एजेंटों का उपयोग करता है, यदि निक्षालन पूरी तरह से नहीं है, तो प्रतिक्रिया प्रणाली में मजबूत क्षार को पेश करना आसान होता है, जिसके परिणामस्वरूप गलत परिणाम होते हैं।

अल्ट्रासोनिक विखंडन भौतिक क्रशिंग का उपयोग करता है, जिसका मानव उपयोग के लिए पीओसीटी के क्षेत्र में अग्रणी उद्यम जीनएक्सपर्ट द्वारा सफलतापूर्वक उपयोग किया गया है, और कुछ जटिल नमूनों (जैसे माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस) के न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण में इसका पूर्ण लाभ है।

इसलिए, न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण चरण के साथ कॉन्फ़िगर किए गए परीक्षण किट या उपकरण का चयन करने की अनुशंसा की जाती है। और यदि कोई अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण मॉड्यूल है तो यह इष्टतम है।

3. मैनुअल, अर्ध-स्वचालित और पूरी तरह से स्वचालित?
यह श्रम लागत और कार्य कुशलता की समस्या है। वर्तमान में, पालतू अस्पतालों में पर्याप्त कर्मचारी नहीं हैं, और न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और पता लगाना एक ऐसा काम है जिसके लिए कुछ कौशल और अनुभव की आवश्यकता होती है। इसमें कोई संदेह नहीं है कि पूरी तरह से स्वचालित न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और पता लगाने वाली मशीन सही विकल्प है।

4. स्थिर तापमान प्रवर्धन या परिवर्तनशील तापमान प्रवर्धन?
प्रवर्धन प्रतिक्रिया एक न्यूक्लिक एसिड डिटेक्शन लिंक है, और इस लिंक में शामिल पेशेवर तकनीक जटिल है। मोटे तौर पर कहें तो, एंजाइमों का उपयोग न्यूक्लिक एसिड को बढ़ाने के लिए किया जाता है। प्रवर्धन प्रक्रिया में, प्रवर्धित प्रतिदीप्ति संकेत या एम्बेडेड प्रतिदीप्ति संकेत का पता लगाया जाता है। सामान्यतया, जितनी जल्दी प्रतिदीप्ति संकेत प्रकट होता है, नमूने की लक्ष्य जीन सामग्री उतनी ही अधिक होती है।

स्थिर तापमान प्रवर्धन एक निश्चित तापमान पर न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन है, जबकि परिवर्तनीय तापमान प्रवर्धन सख्ती से विकृतीकरण-एनीलिंग-विस्तार के अनुसार एक चक्रीय प्रवर्धन है। स्थिर तापमान प्रवर्धन समय लागू किया गया है, जबकि परिवर्तनीय तापमान प्रवर्धन समय उपकरण के तापमान वृद्धि और गिरावट की दर से काफी प्रभावित होता है (वर्तमान में, कई निर्माता लगभग 30 मिनट में प्रवर्धन के 40 चक्र करने में सक्षम हैं)।

यदि प्रयोगशाला की स्थितियाँ अच्छी हैं और ज़ोनिंग सख्त है, तो यह कहना उचित है कि दोनों के बीच सटीकता का अंतर बहुत अच्छा नहीं होगा। हालाँकि, परिवर्तनशील तापमान प्रवर्धन अपेक्षाकृत कम समय में अधिक न्यूक्लिक एसिड उत्पादों को संश्लेषित करेगा। सख्त ज़ोनिंग और पेशेवर प्रशिक्षण कर्मियों के बिना प्रयोगशालाओं के लिए, न्यूक्लिक एसिड एयरोसोल रिसाव का खतरा अधिक होगा, रिसाव होने पर झूठी सकारात्मकता होती है, और जिसे खत्म करना बेहद मुश्किल होता है।

इसके अलावा, जब नमूना जटिल होता है (सापेक्ष प्रतिक्रिया तापमान कम होता है, और विस्तार तापमान जितना अधिक होता है, प्राइमर बाइंडिंग विशिष्टता उतनी ही बेहतर होती है), लगातार तापमान प्रवर्धन भी गैर-विशिष्ट प्रवर्धन के लिए अधिक प्रवण होता है।

जहां तक ​​वर्तमान तकनीक का सवाल है, परिवर्तनशील तापमान प्रवर्धन अधिक विश्वसनीय है।

5. न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन उत्पादों के रिसाव के जोखिम से कैसे बचें?
वर्तमान में, कई निर्माता न्यूक्लिक एसिड प्रतिक्रिया ट्यूब के रूप में ग्रंथि प्रकार पीसीआर ट्यूब का चयन करते हैं, जिसे घर्षण द्वारा सील कर दिया जाता है, और चर तापमान में तापमान विकृतीकरण, परिवर्तनीय तापमान में विकृतीकरण पीसीआर प्रवर्धन 90 डिग्री तक पहुंच जाता है।
सेंटीग्रेड. गर्मी के साथ विस्तार और ठंड के साथ संकुचन की बार-बार होने वाली प्रक्रिया पीसीआर ट्यूब की सीलिंग के लिए एक बड़ी चुनौती है, और ग्रंथि प्रकार पीसीआर ट्यूब में रिसाव का कारण बनना अपेक्षाकृत आसान है।

प्रतिक्रिया उत्पाद के रिसाव से बचने के लिए प्रतिक्रिया को पूरी तरह से सीलबंद किट/ट्यूब के साथ अपनाना बेहतर है। यह बहुत अच्छा होगा यदि न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और पता लगाने के लिए पूरी तरह से सीलबंद किट तैयार की जा सके।

तो न्यू टेक की नई पूरी तरह से स्वचालित न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और पहचान मशीन में उपरोक्त पांच इष्टतम विकल्प हैं।